除病毒過濾在單抗工藝中的應用
除病毒過濾對患者安全至關重要，監管機構越來越多地要求除病毒過濾驗證研究是在***差條件下進行的，ICH Q5A和PDATR41都指出低壓和壓力中斷代表了***差的測試條件，應當在除病毒驗證研究中加以考慮，Cytiva除病毒濾器SV4和Prime相關研究如下。 除病毒過濾概述
單克隆抗體是由單***B細胞克隆產生的高度均***的抗體，主要用于自身免疫疾病、腫瘤、傳染病等領域的治療，生產流程主要為：細胞培養→澄清收獲→層析純化→除病毒過濾→UFDF→制劑。
***些純化工藝可以滅活或者去除部分病毒，由于病毒性質的多樣性，***內外的指南中均指出了建議采用兩種作用機制不同的工藝步驟清除病毒，至少有***步工藝對非包膜病毒有效。PDA TR41技術報告中闡述了除病毒過濾作為藥品生產企業總體病毒安全策略的***部分，基于尺寸排阻的機制為病毒去除提供了有力保障。
然而，隨著對除病毒過濾的知識增加（其中尺寸排阻是主要的去除機制），有報道認為：第***代除病毒過濾器的性能可能會受到過濾中斷和低壓力或低流速的負面影響。
新***代除病毒過濾器旨在克服這些缺點。然而，由于除病毒過濾對患者安全至關重要，監管機構越來越多地要求***終用戶證明他們的除病毒過濾驗證研究是在***差條件下進行的。修訂后的ICH Q5A監管文件和行業指南PDA TR41進***步描述了這***點。這兩份文件都指出，低壓和壓力中斷屬于***差測試條件，應當在除病毒驗證研究中加以考慮。
除病毒產品及應用
Cytiva除病毒過濾產品包括PVDF（聚偏二氟乙烯）和PES（聚醚砜）兩種膜材，滿足不同料液過濾需求。從小試規模到生產***濾器，在生產過程中嚴格遵循相同的質量管理體系，不同批次間有優異的***致性、穩定性，保證生產順利進行。
Pegasus SV4 SV4推薦的過濾壓力為2.1-3.1 bar，在實際生產工藝中，可能會面臨過濾中斷和低壓，可能會對除病毒過濾器的性能產生負面影響。 下圖二測試了SV4在不同壓力下，在不同體積載量下，PP7滴度降的變化情況。 10 psi 的壓力產生***低的 PP7 滴度降（平均滴度降3.8 x 105） 15 psi 和 20 psi 時的平均滴度降高出 1 log 以上（分別為 7.0 x 106 和 2.2 x 106） 當壓力增加到≥30 psi時， PP7滴度降≥107 應該注意的是，即使在測試的***低工作壓力10 psi下， SV4仍然滿足PP7滴度降>104，具有穩健的病毒清除能力。 圖二：SV4不同測試壓力下PP7與體積載量的滴度降情況
SV4壓力中斷研究如下圖三，測試了磷酸鹽緩沖鹽水中的牛血清白蛋白在3.1 bar壓力下，隨著過濾體積載量的增加，中斷10 minutes和30 minutes時，PP7滴度降均5 log以上，具有穩健的病毒清除能力。
圖三：SV4壓力中斷時PP7與體積載量的滴度降情況 Pegasus? Prime
Prime推薦的過濾壓力為2.1-3.1 bar，Cytiva評估了噬菌體PP7在壓力范圍0.2–3.1 bar下，Prime過濾器在磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中0.125–0.25 g/L IgG中的去除情況，如圖五所示，即使在低至0.2 bar壓力下，也有穩健的病毒清除效果。
圖五：Prime在不同壓力下PP7的滴度降情況
Prime壓力中斷研究如下圖六、圖七所示，測試了PBS中0.125 g/L IgG在高壓力2 bar條件和低壓力0.2 bar、0.3 bar條件下，隨著過濾體積載量增加進行壓力中斷，數據顯示Prime濾器的病毒清除效果未受壓力中斷的影響，具有穩健的病毒清除能力。
圖六：Prime在高壓力中斷時PP7的滴度降情況 圖七：Prime在低壓力中斷時PP7的滴度降情況 為了響應人們對在連續生物工藝中使用除病毒過濾器的日益增加的濃厚興趣，Cytiva已經完成了研究，證明SV4和Prime除病毒濾器在低壓和壓力中斷條件下使用的穩健性。 雖然***終用戶有責任驗證除病毒過濾在其特定應用條件下的性能，但本文中顯示的數據有助于證明SV4和Prime強大病毒去除效果，即使在低壓和壓力中斷的***差條件下仍具有穩健的病毒清除能力。
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