TIRF、共聚焦、FRET、光活化和顯微注射技術(shù)幫助科學(xué)們克服了許多活細(xì)胞成像中的困難。所有技術(shù)的核心就是Ti，擁有這款強(qiáng)有力的新型倒置顯微鏡，您可以在尼康CFI60®光學(xué)系統(tǒng)的幫助下輕松使用上述技術(shù)。Ti系列共有三種型號，改進(jìn)的系統(tǒng)速度，提升的靈活性和高效多模式特點(diǎn)使Ti成為用于高端研究和活細(xì)胞成像的理想系統(tǒng)。
1、自動焦點(diǎn)校正系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定時(shí)間序列成像
Ti-E具備尼康獨(dú)特的完美對焦系統(tǒng)（PFS，Perfect Focus System），此系統(tǒng)具備在長時(shí)間時(shí)間序列成像過程中實(shí)時(shí)自動校正焦點(diǎn)漂移的功能。無論是由于溫度變化還是外部機(jī)械震動而引起的焦點(diǎn)漂移都可完美校正。此系統(tǒng)同時(shí)具備自動確認(rèn)焦點(diǎn)的實(shí)用功能。
EB1 ａnd tubulin in the cortex of Physcomitrella patens moss
Images were acquired on a spinning disk confocal with a Plan Apochromat VC 100x 1.4 NA lens at the Marine Biological Laboratory
Movie courtesy of: Drs. Jeroen de Keijzer ａnd Marcel Janson, Wageningen University, ａnd Dr. Gohta Goshima, Nagoya University.
PFS原理示意
下圖中為使用油鏡時(shí)的原理示意圖。此系統(tǒng)通過紅外激光確定玻片與液體的交界面，以此為參照進(jìn)行焦點(diǎn)校正。并通過Offset透鏡調(diào)整焦點(diǎn)與參照面間的距離差距。（此系統(tǒng)亦可用于干式物鏡，并可兼容玻璃與塑料培養(yǎng)裝置）
2、高速電動控制與拍攝
同步高速控制若干電動部件，諸如物鏡轉(zhuǎn)換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺，研究者可以進(jìn)行多維電動實(shí)驗(yàn)。更快的附件運(yùn)動和圖像獲取縮短整體的曝光時(shí)間，減少相應(yīng)的光毒性，幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù)。使用者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復(fù)制觀察條件，實(shí)現(xiàn)用鼠標(biāo)控制載物臺，整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。
3、可使用高數(shù)值孔徑物鏡的高質(zhì)量相差
尼康世界的光學(xué)設(shè)計(jì)者開發(fā)了獨(dú)無二的外部相差單元。使用這革新系統(tǒng)，將相差環(huán)整合至顯微鏡主體而不是物鏡里，使用者不必使用相差專用物鏡來觀察相差圖像，并可以通過高數(shù)值孔徑物鏡來得到高質(zhì)量圖像。另外使用不帶相差環(huán)的物鏡可以得到“亮度”的熒光圖像。
置于顯微鏡主體內(nèi)的相差環(huán)
將原本置于相差物鏡中的相差環(huán)置于顯微鏡的主體的外部相差單元的光路設(shè)計(jì)，便于使用者使用高數(shù)值孔徑物鏡得到高分辨率的相差圖像。根據(jù)所使用的物鏡，有四種類型的相差環(huán)可供選擇（Ti-E/U/S通用）。
4、多層擴(kuò)展設(shè)計(jì)多端口支持
具有左端口、右端口和底*端口的多圖像端口設(shè)計(jì)可以在每個(gè)端口連接個(gè)相機(jī)。另外分層結(jié)構(gòu)的擴(kuò)展空間設(shè)計(jì)可以加入個(gè)后端口，這些特點(diǎn)方便用戶使用雙層熒光濾色塊盒和多相機(jī)進(jìn)行圖像獲取。 * Ti-E/B和Ti-U/B組合可選底端口。
使用可選的后端口設(shè)計(jì)擴(kuò)展了圖像獲取能力。與側(cè)端口結(jié)合使用可以用兩個(gè)相機(jī)獲取雙通道圖像。例如當(dāng)FRET (福斯特共振能量轉(zhuǎn)移)的熒光蛋白間有觀察間隔、CFP和YFP的強(qiáng)度差別很大時(shí)，可以通過調(diào)節(jié)單個(gè)相機(jī)的靈敏度來得到高信噪比圖像進(jìn)行比較。
分層結(jié)構(gòu)提高可擴(kuò)展性
Ti采用的分層結(jié)構(gòu)充分利用了無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)的優(yōu)勢，另外將PFS整合到物鏡轉(zhuǎn)換器。可以通過墊高塊在光路中引入PFS外的兩個(gè)可選部件，利用該系統(tǒng)可以同時(shí)使用激光鑷、光活化單元和落射熒光裝置。每層的電動熒光濾色塊盒可以單獨(dú)控制。
5、***與快速的電動控制
非凡的快速圖像獲取
對96孔板進(jìn)行三通道（雙通道熒光和相差）快速拍攝，速度提高2倍以上。
數(shù)字控制集線器顯著提升了電動附件的速度
尼康新研發(fā)的數(shù)字控制集線器通過減少部件間的通訊時(shí)間，提高各附件的速度，進(jìn)而顯著提高整體的操作速度。 PC控制對Ti的電動部件進(jìn)行優(yōu)化，縮短從動作命令到移動間的反應(yīng)時(shí)間，從而對整體施行高速控制。 通過增加智能固件，電動部件的整體操作時(shí)間顯著縮短，例如三通道（雙通道熒光和相差）連續(xù)圖像獲取需要的總時(shí)間大大縮短，減少了對細(xì)胞的光毒性。
高速電動控制與圖像獲取
同步控制若干電動部件，諸如物鏡轉(zhuǎn)換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺*，研究者可以進(jìn)行多維電動實(shí)驗(yàn)。更快的附件運(yùn)動和圖像獲取縮短整體的曝光時(shí)間，減少相應(yīng)的光毒性，幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù)。
*電動載物臺移動速度25mm/s、步進(jìn)0.1um、重復(fù)精度0.5um（編碼型）3um（非編碼型）；熒光濾色塊切換時(shí)間300ms。
提升每個(gè)電動部件的速度
操作和/或轉(zhuǎn)換物鏡、濾光塊、XY載物臺、激發(fā)/阻擋濾光片的速度大幅增加，研究者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復(fù)制觀察條件，實(shí)現(xiàn)用鼠標(biāo)控制載物臺，整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。
6、各種光學(xué)技術(shù)的完美圖像
尼康優(yōu)化的光學(xué)技術(shù)提供多種模式觀察標(biāo)本，向研究者呈現(xiàn)細(xì)胞的每個(gè)細(xì)節(jié)。
Nomarski 微分干涉（DIC）
高對比度和高分辨率的平衡對于觀察細(xì)微結(jié)構(gòu)至關(guān)重要。尼康獨(dú)有的DIC系統(tǒng)即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率圖像。新型DIC滑塊（干）提供高分辨率和高對比度兩種選擇。濾光塊型DIC檢偏器可以置于電動濾光塊盒內(nèi)，將DIC觀察和熒光觀察的切換時(shí)間顯著縮短。
相差
相差圖像觀察時(shí)可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil)。該物鏡與傳統(tǒng)相差物鏡相比減少了相差圖像的光暈，增強(qiáng)了圖像的對比度。
暗場
使用高NA的聚光鏡可以進(jìn)行暗場觀察。可以對微粒子進(jìn)行長時(shí)間的觀察，并避免光漂白。
霍夫曼調(diào)制相差（HMC）®
HMC物鏡與HMC聚光鏡部件組合可以得到類似3D的高對比度、無光暈圖像，可以應(yīng)用于培養(yǎng)在塑料培養(yǎng)皿中的透明樣本。
7、為Ti系列研發(fā)的新型物鏡
CFI S Plan Fluor ELWD/ELWD相差物鏡
新研發(fā)的物鏡對近紫外（Ca2+）到近紅外波長范圍內(nèi)的光都有高通透性，并且改進(jìn)了色差校正。在多種照明模式下都可以得到高質(zhì)量無色差的圖像。
Plan Apochromat 20x物鏡
新型20x物鏡加入尼康專有的VC物鏡系列，該物鏡的軸向色差校正至405nm，是用于共聚焦觀察和光活化技術(shù)的理想物鏡。
8、人體工學(xué)設(shè)計(jì)
用于電動操作的所有按鍵和控制轉(zhuǎn)換器設(shè)計(jì)都非常人性化，研究者可以不受到顯微鏡操作的影響，專注于研究。
操作按鍵位于顯微鏡主體的兩側(cè)和前面
熒光濾色塊的切換、物鏡轉(zhuǎn)換、Z軸粗/微調(diào)、PFS開/關(guān)控制、透射照明開/關(guān)控制都可以通過位于顯微鏡主體的按鍵進(jìn)行快速切換。
新研發(fā)的人機(jī)學(xué)控制器
通過手柄或人機(jī)學(xué)控制器可以控制高速電動XY載物臺和Z軸。
顯微鏡主體前面的VFD屏幕和操作按鍵
包括物鏡信息在內(nèi)的顯微鏡狀態(tài)和PFS的開/關(guān)狀態(tài)都會顯示在VFD屏上。
遠(yuǎn)程控制面板和預(yù)設(shè)按鍵
通過遠(yuǎn)程控制面板可以操作顯微鏡，并確認(rèn)顯微鏡目前的狀態(tài)。另外可以通過預(yù)設(shè)按鍵來自動切換觀察條件。只需單單個(gè)按鍵就可以完成從相差到熒光觀察的切換。
原創(chuàng)傾斜式設(shè)計(jì)
將顯微鏡主體的前部稍稍向后傾斜，操作者眼點(diǎn)與標(biāo)本間的距離縮短了約40mm，增強(qiáng)了可操作性。
9、三種機(jī)型給類應(yīng)用
*Ti-E
旗艦型號具備電動與自動多模式成像技術(shù)（可選底部端口型號）。
*Ti-U
通用型型號可配置激光照明器與多種電動部件（可選底部端口型號）。
*Ti-S
基本型號可用于特定類型應(yīng)用。
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